Historien kredser om Elena Gilbert, en teenager fra Mystic Falls, Virginia, som finder sig selv splittet mellem to vampyrbrødre, Stefan og Damon Salvatore. Stefan er en venlig og medfølende vampyr, der forsøger at modstå hans blodtørst, mens Damon er en mørk og farlig vampyr, der svælger i hans natur.
Da Elena lærer mere om den overnaturlige verden, bliver hun viklet ind i et komplekst net af hemmeligheder, løgne og forræderi. Hun skal navigere i sine forhold til venner og familie, samtidig med at hun beskytter sig selv mod de farlige kræfter, der er på arbejde i Mystic Falls.
Gennem hele serien får Elena, Stefan og Damon selskab af en cast af andre karakterer, inklusive Bonnie Bennett, en magtfuld heks; Caroline Forbes, en vampyr, der kæmper med sin identitet; Matt Donovan, et menneske, der er fanget i den overnaturlige verden; og Alaric Saltzman, en historielærer, der bliver vampyrjæger.
"The Vampire Diaries" udforsker temaer om kærlighed, tab, forløsning og opofrelse. Den dykker ned i den mørke side af den menneskelige natur og de kampe, der følger med udødelighed. Showet byder også på mange intense og romantiske øjeblikke, og det har fået en dedikeret og passioneret fanskare rundt om i verden.